Gli amici che fanno esperimenti sulle cellule devono spesso usare metodi di congelamento delle cellule. In breve, la conservazione congelata delle cellule serve a salvare le cellule in un ambiente a bassa temperatura per raggiungere lo scopo della conservazione a lungo termine. Le cellule avranno un certo grado di mutazione durante il processo di trasmissione. Al fine di garantire che le cellule possano ancora essere utilizzate in caso di inquinamento e mutazione cellulare, alcune cellule vengono solitamente utilizzate per il congelamento.
Il principio della cellula congelata
Un principio nel processo di congelamento e recupero cellulare è la "fusione congelata lenta" per preservare al massimo la vitalità delle cellule. In poche parole, deve essere lento quando congelato e raffreddato e deve essere riscaldato rapidamente quando viene recuperato dalla bassa temperatura. La ragione del congelamento lento è che se le cellule vengono poste direttamente in un ambiente a temperatura ultra bassa come l'azoto liquido, le cellule formano un grande cristallo di ghiaccio, che danneggerà le cellule.
Se lo congeli lentamente, le cellule possono essere disidratate lentamente per raggiungere lo scopo di proteggere le cellule. Inoltre, durante il recupero, è anche per evitare che piccoli cristalli di ghiaccio formino grandi cristalli di ghiaccio, cioè i cristalli pesanti dei cristalli di ghiaccio. Pertanto, quando tutti di solito congelano le cellule, le cellule subiscono sempre perdite, il che potrebbe avere un impatto nella fase di congelamento.
Diversi metodi di cella congelata
Metodo manuale: la cellula congelata viene solitamente conservata in azoto liquido. Il metodo di funzionamento manuale consiste nel raffreddare il gradiente nel frigorifero. Salva le cellule nel tubo di conservazione congelato e mettile in un ambiente frigorifero a 4 gradi C, -20 gradi C, -80 gradi C nell'ordine. Congelato per 24 ore a -80 gradi C prima del trasferimento in azoto liquido. Il raffreddamento manuale non richiede supplementi aggiuntivi di altri materiali di consumo. Può essere azionato manualmente. È il più semplice, ma non è semplice. L'operazione effettiva è fastidiosa. E l'effetto non è molto buono, perché questo metodo di raffreddamento non è ancora uniforme e non è necessariamente applicabile per celle più fragili.
Scatola di raffreddamento a gradiente: la scatola di raffreddamento a gradiente venduta sul mercato è particolarmente utilizzata nel raffreddamento uniforme del processo di congelamento. La velocità di raffreddamento è solitamente di -1 gradi/minuto. Metti il tubo di conservazione congelato nella scatola di raffreddamento del gradiente e posiziona la scatola di raffreddamento del gradiente direttamente nell'ambiente frigorifero di -80 gradi C per passare la notte senza il funzionamento manuale del gradiente. Quindi abbassare il tubo di deposito e metterlo in azoto liquido. L'effetto dell'utilizzo di scatole di raffreddamento a gradiente è migliore, perché le scatole di raffreddamento commerciali sul mercato possono garantire una velocità di raffreddamento approssimativamente uniforme.
Sul mercato sono disponibili due comuni scatole di raffreddamento a gradiente. È necessario aggiungere isopropile, di solito un corpo di una scatola per PC. Quando si utilizza, aggiungendo isopenol alla linea di ridimensionamento nella scatola quando lo si utilizza. L'isopropanolo viene utilizzato come vettore per l'accumulo e la distribuzione del calore.
Un altro tipo non ha bisogno di essere aggiunto con isopropilico, schiuma e il congelatore può essere posizionato direttamente durante l'uso, il che è più comodo da usare.
Si consiglia la scatola di raffreddamento dell'isopropanolo per sostituire il liquido dopo averlo utilizzato più volte, ma poiché l'isopropanolo è un liquido dannoso, che causa danni agli esperimenti e all'ambiente, di solito può essere utilizzato più volte. Tuttavia, è necessario assicurarsi che il liquido sia in una certa quantità.
Conservazione congelata non programmata: Utilizzare liquidi congelati non programmati che possono essere acquistati sul mercato. Rispetto al tradizionale liquido congelato, il componente interno può ridurre il danno alle cellule del cristallo di ghiaccio, quindi non è necessario utilizzare il gradiente per raffreddare, né richiede la scatola di raffreddamento del gradiente. La conservazione congelata può essere collocata direttamente in un ambiente frigorifero di -80 gradi C.
Molti campioni di cellule sono molto preziosi. Oltre a noi, dobbiamo usarlo quando facciamo esperimenti. È inoltre necessario scegliere il più possibile buoni prodotti nella selezione dei prodotti correlati. Seleziona il tubo di conservazione congelato con qualità qualificata, prova a utilizzare lo strumento di raffreddamento del gradiente per il congelamento e massimizza la garanzia di un basso danno alle cellule per evitare piccole perdite dovute a minori.
