I microrganismi sono un gruppo di organismi microscopici ampiamente distribuiti in natura e invisibili ad occhio nudo, inclusi batteri, spirochete, rickettsie, clamidie, micoplasmi, actinomiceti, funghi, virus, ecc., con struttura semplice ed esistono in un'unica cellula, gruppo di celle o stato non di cella. Nelle condizioni di fornire nutrienti e un ambiente adatto, possono generalmente vivere in modo indipendente e crescere rapidamente. Per evitare la morte e l'inquinamento dei microrganismi, mantenere le loro proprietà originali sostanzialmente stabili e facilitare la ricerca e l'uso, è necessario utilizzare la tecnologia della conservazione del ceppo. Ecco alcuni metodi comuni per la conservazione dei batteri.
Crioconservazione
Questo metodo è adatto per la maggior parte dei microrganismi e dei virus che necessitano di conservazione a lungo termine. Il principio è che nell'ambiente a temperatura ultra bassa, l'attività metabolica microbica si interrompe e generalmente più bassa è la temperatura, migliore è l'effetto.
Metodo di risparmio
Utilizzare un tubo di crioconservazione per preservare il batterioria, e allo stesso tempo necessitano di agenti protettivi, come glicerina, polvere di pecora sgrassata o dimetilsolfossido. Il tubo di conservazione congelato contenente i batteri viene posto in frigorifero a - 60~- 80 gradi per il congelamento e la conservazione.
Metodo di conservazione della paraffina liquida
Il metodo di conservazione della paraffina liquida è applicabile ad alcuni batteri che non possono decomporre la paraffina, come lievito, bacillo, penicillium, aspergillus, ecc. Alcuni batteri e funghi non sono adatti per la conservazione con questo metodo. Il metodo della paraffina liquida utilizza la paraffina liquida per coprire, il metabolismo microbico è inibito e l'invecchiamento batterico è ritardato. Il metodo della paraffina può impedire l'ingresso di ossigeno, impedendo ai batteri aerobici di continuare a crescere. Allo stesso tempo, se l'acqua nel terreno di coltura evapora, è facile provocare la morte batterica. Il metodo della paraffina può impedire l'evaporazione dell'acqua nel terreno di coltura e prolungare il tempo di conservazione dei batteri.
Metodo di risparmio
In condizioni sterili, iniettare paraffina liquida sterilizzata nella coltura inclinata appena coltivata, il livello del liquido è 1 cm ~ 2 cm più alto della parte superiore dell'inclinazione, aggiungere un tappo di gomma e sigillare con paraffina solida per isolare i batteri dall'aria. Il ceppo iniettato con olio di paraffina deve essere conservato in posizione verticale in un luogo asciutto a bassa temperatura (4 gradi ~ 6 gradi) oa temperatura ambiente.
Metodo di conservazione per liofilizzazione
Questo metodo è adatto alla conservazione della maggior parte dei microrganismi, ma non dei funghi filamentosi che non producono spore. Il metodo di conservazione della liofilizzazione consiste nel preservare i batteri a bassa temperatura, in condizioni asciutte e anossiche. Cioè, congelare rapidamente il ceppo a bassa temperatura per mantenere intatto il microrganismo, quindi decomprimere ed estrarre l'aria per sublimare il ghiaccio fino a quando non viene disidratato e asciugato, quindi sigillare e isolare l'aria allo stato vuoto per arrestare l'attività metabolica microbica , in modo da conservarlo a lungo.
Metodo di risparmio
Aggiungere l'agente protettivo nel tubo dell'ampolla secondo una determinata formula, quindi aggiungere i batteri per preparare la sospensione batterica. Pre-liberare il tubo dell'ampolla a - 15~- 20 gradi, quindi asciugare il tubo dell'ampolla con un liofilizzatore sottovuoto e sigillare il tubo dell'ampolla. Conservare a bassa temperatura e al riparo dalla luce.
Metodo di conservazione del tubo di sabbia
Questo metodo è adatto per la conservazione di actinomiceti sporigeni, bacilli, ecc., ma non per la conservazione di funghi e funghi patogeni che si concentrano principalmente sullo sviluppo delle ife. L'uso di sabbia fine per creare condizioni asciutte può rallentare le attività metaboliche di quei microrganismi che possono produrre spore o spore in un ambiente secco, inibirne la velocità di riproduzione e avere una forte resistenza alla morte. Questo metodo può ridurre la mutazione del ceppo e prolungare il tempo di sopravvivenza.
Metodo di risparmio
Setacciare la sabbia di fiume e di mare con 60 maglie, scartare le particelle grosse e le impurità, quindi setacciare con 80 maglie per rimuovere la sabbia fine. Assorbire il ferro con una pietra per l'assorbimento del ferro, metterlo nel contenitore e immergerlo con acido cloridrico al 10%. Se ci sono molte sostanze organiche nella sabbia del fiume, immergila con acido cloridrico al 20%. Dopo 24 ore, rimuovere l'acido cloridrico, immergerlo più volte in acqua di rubinetto fino a quando non è neutro e cuocere o asciugare la sabbia. Inoltre, dieci suoli al di sotto della superficie incontaminata sono stati vagliati per 100 giorni, lavati a neutralità con acqua di rubinetto ed essiccati. Mescolare uniformemente in base alla sabbia: terreno =2: 1, sub-imballare in una provetta per fiale o provetta piccola, l'altezza è di circa 1 cm, inserire il tampone di cotone, autoclavare a 121 gradi per 1h~1.5h o autoclavare a pressione normale per 3 volte, 16 volte al giorno. Asciugalo sotto i 50 gradi (la temperatura non dovrebbe essere troppo alta, altrimenti la materia organica del suolo verrà decomposta dall'alta temperatura per produrre sostanze nocive, che influiranno sulle prestazioni del ceppo), e può essere utilizzata solo se non c'è crescita microbica dopo l'ispezione.
Quindi preparare la sospensione batterica e aggiungere la sospensione batterica nel tubo della sabbia. Mettere il tubo di sabbia contenente la sospensione batterica nell'essiccatore sottovuoto per l'asciugatura sottovuoto. Utilizzare la fiamma per sigillare e sciogliere l'ugello, conservarlo a bassa temperatura (4 gradi ~ 10 gradi) o in un luogo asciutto a temperatura normale e controllare regolarmente la vitalità e i vari batteri.
Metodo di conservazione delle perle di porcellana
Di solito ci sono tubi di conservazione in porcellana finiti che sono facili da usare sul mercato per la conservazione a bassa temperatura dei batteri. Il tubo di conservazione delle perle di porcellana è solitamente composto da un tubo di conservazione congelato, nonché dalla soluzione di conservazione interna e dalle perle di porcellana. Perle di porcellana con superficie concava e convessa vengono utilizzate per l'assorbimento e la conservazione dei batteri. Il ceppo può essere conservato a lungo a - 20 grado o - 80 grado . È più facile da usare sia in deposito che in rianimazione.
Metodo di risparmio
Raschiare la coltura pura di batteri dalla piastra e inserirla nel tubo di conservazione della coltura e configurarla approssimativamente in 3-4 concentrazioni di Michaelis. Agitare per emulsionare i batteri, lavare la soluzione di conservazione, serrare il tubo di conservazione e congelare a bassa temperatura.
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