Non so se hai spesso bisogno di acquistare materiali di consumo. Se acquisti spesso materiali di consumo di laboratorio, potresti scoprire che vari produttori possono etichettare i loro prodotti come privi di enzimi, pirogeni ed endotossine, in particolare per i materiali di consumo che coinvolgono la biologia cellulare e la biologia analitica, come le comuni provette da centrifuga da 15 ml e 50 ml, flaconi per colture cellulari, piatti di coltura cellulare, piastre di coltura cellulare, provette per crioconservazione scheda PCR e altri prodotti. I prodotti con queste descrizioni possono anche essere più costosi dei normali prodotti simili. Quindi quali sono i significati di queste affermazioni e come influenzano i nostri esperimenti? Come dobbiamo fare le scelte quando facciamo acquisti? Ecco una breve introduzione.
Definizione
1.Pirogeno
Il pirogeno si riferisce alla sostanza pirogena che può causare un aumento anomalo della temperatura corporea dopo essere stata iniettata nel corpo. In senso lato, il pirogeno include il pirogeno batterico, il pirogeno macromolecolare endogeno, il pirogeno endogeno a basso peso molecolare e il pirogeno chimico. Il "pirogeno" qui si riferisce principalmente al pirogeno batterico, che è il metabolita di alcuni microrganismi, cadaveri batterici ed endotossina.
2.Enzima
Gli enzimi sono stati appresi alle scuole medie. Come catalizzatore biologico, gli enzimi possono catalizzare efficacemente varie reazioni biochimiche nei nostri organismi. Tuttavia, quando la maggior parte dei prodotti non dice nessun enzima, in realtà più precisamente, non intendono tutti gli enzimi, ma le nucleasi. Molti produttori scrivono anche DNase free e RNase free. La nucleasi può decomporre le molecole di acido nucleico. Può degradare in modo specifico il DNA o l'RNA e può anche agire su molecole di DNA e RNA con bassa specificità.
3.Endotossina
Endotossina è un termine generico per sostanze tossiche presenti nei batteri gram-negativi. È il componente della parete cellulare di una varietà di batteri gram-negativi. È la tossina rilasciata dopo che la cellula è stata rotta e il componente è il lipopolisaccaride. Si ritiene generalmente che l'endotossina sia un pirogeno. È generalmente accettabile durante la produzione di farmaci: se non c'è endotossina, non c'è pirogeno. Pertanto, durante la produzione, è possibile eseguire solo il test delle endotossine senza il test dei pirogeni.
Influenza
Il pirogeno e l'endotossina possono stimolare il corpo e causare la febbre. Nei campi farmaceutico, clinico e di altro tipo, per motivi di sicurezza umana, di solito ci sono requisiti per la quantità di pirogeno ed endotossina. Nella farmacopea cinese sono stati forniti metodi specifici per la rilevazione di pirogeni ed endotossine. Quando si tratta di laboratori molecolari, la nucleasi può degradare i frammenti molecolari bersaglio perché può decomporre il DNA. Ad esempio, negli esperimenti PCR, se la nucleasi è contaminata, potrebbe non esserci alcun valore CT, con conseguenti risultati falsi positivi. Pertanto, i materiali di consumo come ventosa e PCR sono generalmente privi di nucleasi.
Rilevazione di pirogeni ed endotossine
Quella che segue è una breve introduzione ai test dei pirogeni e delle endotossine nella farmacopea.
test 1.Pirogeno
Il metodo del coniglio per il rilevamento dei pirogeni è descritto nella Regola generale della farmacopea cinese 1142. Utilizzare conigli sani e qualificati, iniettare una certa quantità di sostanza di prova nei conigli per via endovenosa e osservare l'aumento della temperatura dei conigli entro il tempo specificato. Gli utensili di prova a contatto con l'oggetto di prova devono essere sterili e apirogeni. Il pirogeno viene solitamente rimosso mediante sterilizzazione a calore secco (250 gradi, più di 30 minuti) o altri metodi appropriati. Se la temperatura del coniglio testato sale a un certo standard entro un certo periodo di tempo, si considera che il test pirogeno dell'articolo di prova non soddisfi i requisiti.
test 2.Endotoxin
Prima del test dell'endotossina, il test del limulus veniva utilizzato a livello internazionale. I metodi specifici includono il metodo del gel e il metodo fotometrico. Il reagente Limulus può agglutinarsi con l'endotossina batterica per produrre un cambiamento di gel o di torbidità e il contenuto di endotossina può essere determinato misurando questo cambiamento. Il lisato di amebociti di Tachypleus è una specie di reagente estratto dal sangue dell'artropode marino Tachypleus lisato di amebociti. Pertanto, il lisato di amebociti di Tachypleus è stato catturato e ucciso in grandi quantità in tutto il mondo ed è diventato anche un animale protetto nazionale di seconda classe in Cina. Al momento, la FDA ha approvato il metodo del fattore C ricombinante per sostituire il reagente TAL. Questa legge è stata citata anche nei principi guida della Farmacopea cinese.
Come selezionare
In effetti, non è difficile scegliere dopo aver compreso questi concetti. Si basa principalmente sulle tue esigenze. In generale, i materiali di consumo senza enzimi e pirogeni sono comuni e i prodotti senza endotossina sono relativamente pochi. Se l'esperimento stesso non ha requisiti elevati per questi, è possibile utilizzare materiali di consumo ordinari. Ad esempio, quando si centrifugano cellule o componenti correlati, è preferibile utilizzare una provetta da centrifuga senza enzimi e pirogeni, mentre le normali provette da centrifuga possono effettivamente essere utilizzate per la normale centrifugazione di liquidi.
Inoltre, questo è anche un problema che avranno molti utenti. Al momento dell'acquisto di provette da centrifuga da alcune aziende, chiederanno se le provette da centrifuga possono essere riutilizzate. In effetti, questo problema verrà discusso in base alla situazione, poiché i tubi della centrifuga sono stati inquinati in una certa misura dopo essere stati utilizzati una volta e anche la sterilizzazione a vapore a pressione non può eliminare completamente l'inquinamento, pertanto, se lo si utilizza di nuovo, dipende dalle esigenze dell'utente per l'esperimento.
In ultima analisi, tutti i prodotti sono per sperimentatori ed esperimenti. Non possiamo influenzare i nostri esperimenti a causa dei prodotti, ma dobbiamo scegliere i prodotti appropriati in base ai nostri esperimenti.
Provetta da centrifuga BKMAM senza pirogeni, senza ribozimi, senza endotossine, 0.5 ml, 1,5 ml, 2 ml, 5 ml, 10 ml, 15 ml, 50 ml a scelta.
Tubo Cryovials privo di pirogeni, ribozimi, endotossine, filettatura interna, filettatura esterna, con 1 ml, 2 ml, 3 ml, 4 ml, 5 ml per scegliere.
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