La conoscenza microbica che desideri
I microrganismi sono un gruppo di minuscoli organismi che esistono ampiamente in natura e sono invisibili ad occhio nudo e devono essere ingranditi centinaia, migliaia o addirittura decine di migliaia di volte con l'aiuto di un microscopio ottico o di un microscopio elettronico. Presentano i vantaggi di dimensioni ridotte, struttura semplice, rapida riproduzione, facile variazione e forte capacità di adattamento all'ambiente.
Classificazione dei microrganismi:
Esistono molti tipi di microrganismi, almeno più di 100,000 tipi. Secondo la loro struttura, composizione chimica e abitudini di vita e altre differenze possono essere suddivise in tre categorie.
Il nucleo delle cellule microbiche eucariotiche ha un più alto grado di differenziazione, tra cui membrana nucleare, nucleolo e cromosomi; il citoplasma ha organelli completi (come reticolo endoplasmatico, ribosoma e mitocondri, ecc.). I funghi appartengono a questo tipo di microrganismo.
Le cellule microbiche procariotiche hanno un basso grado di differenziazione nucleare, solo nucleoplasma primitivo, nessuna membrana nucleare e nucleolo; gli organelli non sono molto completi. Esistono molte specie di tali microrganismi, inclusi batteri, spirochete, micoplasma, rickettsia, clamidia e actinomiceti.
I microrganismi acellulari non hanno una struttura cellulare tipica e nessun sistema enzimatico per generare energia e possono crescere e riprodursi solo in cellule viventi. I virus appartengono a questo tipo di microrganismo.
Separazione e purificazione di microrganismi
Una coltura microbica contenente più di una specie è chiamata coltura mista. Se tutte le cellule di una colonia derivano da una cellula parentale, allora la colonia viene chiamata coltura pura. Nell'identificazione delle specie batteriche, i microrganismi utilizzati devono essere generalmente colture pure. Il processo per ottenere una cultura pura è chiamato separazione e purificazione e ci sono molti metodi.
1. Metodo della piastra di colata
First, the microbial suspension is diluted in a series, and a certain amount of the dilution is fully mixed with the dissolved nutrient agar medium maintained at about 40-50 degree , and then the mixture is poured into a sterile petri dish. After solidification, the plate was incubated upside down in a constant chamber. A single cell is multiplied to form a colony, a single colony is taken to make a suspension, and the above steps are repeated several times to obtain a pure culture.
2. Metodo di rivestimento piatto piatto
In primo luogo, la sospensione microbica viene opportunamente diluita e una certa quantità della diluizione viene posta su una piastra di agar nutriente sterile che si è solidificata, quindi la diluizione viene distribuita uniformemente sulla superficie del terreno con una spatola di vetro sterile. Una singola colonia può essere ottenuta mediante incubazione a temperatura costante.
3. Metodo di incisione su lastra
Il modo più semplice per isolare i microrganismi è la striatura. Strisciare una piccola quantità di coltura sulla piastra utilizzando un'ansa sterile. Ci sono molti metodi di scrittura. I metodi di incisione comuni che hanno maggiori probabilità di far apparire una singola colonia sono il metodo della barra, il metodo della curva, il metodo del quadrato, il metodo della radiazione e il metodo delle quattro griglie. Quando l'ansa di inoculazione si sposta all'indietro sulla superficie del terreno, il liquido batterico sull'ansa di inoculazione viene gradualmente diluito e infine una singola cellula viene dispersa sulla linea tracciata. Dopo la coltura, ogni cellula cresce in una colonia.
4. Metodo di coltura di arricchimento
Il metodo e il principio del metodo della coltura di arricchimento sono molto semplici. Possiamo creare condizioni che consentano la crescita solo dei microbi desiderati, e in queste condizioni i microbi desiderati possono competere efficacemente con altri microbi e superare di gran lunga gli altri microbi in termini di capacità di crescita. Se devono essere isolati alcuni parassiti obbligati, i campioni devono essere inoculati nelle corrispondenti popolazioni di cellule ospiti suscettibili per crescere in gran numero. I batteri parassiti puri possono essere ottenuti mediante semina ripetuta.
5. Metodo anaerobico
In laboratorio, per isolare alcuni batteri anaerobi, una provetta contenente il terreno originale può essere utilizzata come recipiente di coltura e la provetta può essere riscaldata in un bagno di acqua bollente per alcuni minuti per espellere l'ossigeno disciolto nel terreno . Viene quindi rapidamente raffreddato e inoculato. Dopo l'inoculazione, alla superficie del terreno è stata aggiunta paraffina sterile per isolare il terreno dall'aria. Un altro metodo consiste nel sostituire il gas nel mezzo con N2 o CO2 dopo l'inoculazione, quindi sigillare l'imboccatura della provetta su una fiamma. A volte, per isolare in modo più efficiente alcuni batteri anaerobici, il campione isolato può essere inoculato sul terreno, quindi la capsula di Petri può essere collocata in un dispositivo di coltura anaerobica completamente sigillato.
6. Metodo di isolamento a singola cellula (o singola spora).
È necessario utilizzare il metodo di microseparazione per isolare direttamente singole cellule o singoli individui da popolazioni miste affinché la coltura ottenga una coltura pura. Per i microrganismi più grandi, un singolo individuo può essere estratto utilizzando un capillare. Per i microrganismi con individui relativamente piccoli, è necessario un micromanipolatore per prelevare singole cellule microbiche o spore con un capillare o un microago, uncino, cappio, ecc. al microscopio per ottenere una coltura pura. Il metodo di separazione a cella singola ha requisiti relativamente elevati sulla tecnologia operativa.
Coltura microbica
1. A seconda della necessità di ossigeno durante la coltura, può essere suddivisa in due categorie: coltura aerobica e coltura anaerobica.
Cultura aerobica: nota anche come "cultura aerobica". Vale a dire, quando questo microrganismo viene coltivato, ha bisogno di essere aggiunto di ossigeno, altrimenti non crescerà bene. In laboratorio, le colture slant si ottengono prelevando aria sterile dall'esterno attraverso tamponi di cotone. La maggior parte della coltura liquida nella beuta Erlenmeyer viene agitata da uno shaker, in modo che l'aria esterna possa entrare continuamente nella bottiglia.
Cultura anaerobica: nota anche come "cultura anaerobica". Tali microrganismi non richiedono ossigeno per partecipare alla coltivazione. Nel processo di coltivazione di microrganismi anaerobici, il punto più importante è rimuovere l'ossigeno nel terreno.
2. Secondo lo stato fisico del mezzo, può essere suddiviso in due categorie: coltura solida e coltura liquida.
Coltura solida: è un metodo per inoculare i ceppi in un mezzo solido sciolto e ricco di sostanze nutritive e coltivare i microrganismi in condizioni adeguate.
Coltura liquida: negli esperimenti, la coltura liquida può far moltiplicare rapidamente i microrganismi e ottenere un gran numero di colture. In determinate condizioni, è anche un metodo efficace per i microrganismi per selezionare e arricchire i batteri.
BKMAM biotech fornisce materiali di consumo di laboratorio corrispondenti per la coltura microbica:
Piastre di Petri rotonde/quadrate in plastica usa e getta:
lMateriale in polistirene ad alta trasparenza (PS);
lLa superficie è liscia e piatta e non vi è alcuna distorsione ottica delle cellule sotto osservazione al microscopio;
l Il design impilabile facilita l'impilamento e lo stoccaggio;
l Sterilizzazione con ossido di etilene (EO);
l Resistenza all'usura e alla corrosione.
Bastoncino/ansa per inoculazione in plastica monouso:
Materiale in polistirene (PS);
Anti-inquinamento, privo di endotossine, DNasi, RNasi e pirogeni;
L'imballaggio indipendente è stato sterilizzato;
Pregevole fattura e specifiche complete;
Spargitore di cellule in plastica usa e getta, spargitore di batteri:
Materiale in polistirene (PS);
Anti-inquinamento, privo di endotossine, DNasi, RNasi e pirogeni;
Design a forma di L, facile da usare;
Uso singolo, leggero e conveniente.
Piastre in acciaio inossidabile / sterili monouso:
La targhetta delle specifiche in acciaio inossidabile è realizzata in acciaio inossidabile e la targhetta delle specifiche usa e getta è realizzata in polipropilene alimentare (PP).
Anti-inquinamento, privo di endotossine, DNasi, RNasi e pirogeni;
L'area di sbavatura è rigorosamente standardizzata
Un lato della targhetta delle specifiche è dotato di una maniglia, facile da usare
Confezione singola sterile sigillata per evitare la contaminazione secondaria del campionamento e l'errore nei risultati
Uso una tantum per evitare la contaminazione incrociata e ridurre il carico di lavoro
Benvenuti a collaborare con noi
Cordiali saluti
Michael Peng
michael@bkmbio.com
