Come scegliere il piatto Elisa?

ELISA con pessimo risultato?Seguiteci per scegliere il piatto Elisa corretto.

La scelta di una piastra ELISA adatta è il primo passo per un esperimento ELISA di successo, ma molte persone lo ignorano. Quando le persone fanno esperimenti, spesso considerano solo l'esperimento stesso, ma non sanno che il prodotto ha spesso un grande impatto sull'esperimento. Una corretta selezione dei prodotti contribuirà al successo dell'esperimento. Di solito prendiamo in considerazione i seguenti fattori quando conduciamo esperimenti ELISA:

1. La forma del fondo

Al momento, i produttori progettano i pozzetti etichettati con enzimi come colonne indipendenti e aumentano in modo appropriato la distanza tra i pozzetti in modo che possano essere separati in modo indipendente, riducendo così al minimo la contaminazione incrociata. Diversi tipi di piatti Elisa hanno diverse forme del fondo del pozzo. Ecco alcune forme comuni del fondo del foro:

Fondo piatto: il fondo è orizzontale, chiamato anche F fondo. La luce non verrà deviata attraverso il fondo, che può trasmettere la luce nella massima misura. Utilizzare per esperimenti che richiedono un fondo tondo per visibilità o altri motivi.

Fondo tondo: noto anche come fondo a U, fornisce i migliori risultati di pulizia e prestazioni ibride, adatto per applicazioni che necessitano di testare i sedimenti.

Fondo a C: può fornire un buon effetto pulente tra il fondo piatto e il fondo tondo, combinando i vantaggi del fondo piatto.

Cone Bottom: noto anche come V-bottom, è adatto per il campionamento preciso e la conservazione di microcampioni per un recupero ottimale di piccoli volumi.

2. Il colore del piatto Elisa

Sono tre i colori del piatto Elisa: trasparente, nero e bianco.

La maggior parte di ELISA sceglie lastre trasparenti come materiali sperimentali. Le lastre Elisa bianche e nere sono generalmente utilizzate per il rilevamento della luminescenza. La stessa lastra ELISA nera assorbe la luce, quindi il suo segnale è più debole di quello della lastra ELISA bianca. Le lastre Elisa nere sono generalmente utilizzate per rilevare una luce più forte, come il rilevamento della fluorescenza; al contrario, le lastre Elisa bianche possono essere utilizzate per il rilevamento di luce più debole e sono spesso utilizzate per la chemiluminescenza generale e lo sviluppo del colore del substrato (come la doppia luciferasi). analisi del gene reporter).

3. Il materiale del piatto Elisa

I materiali comuni sono polietilene (PE), polipropilene (PP), polistirene (PS), cloruro di polivinile (PVC) e policarbonato (PC).

The most widely used materials in ELSIA are polystyrene and polyvinyl chloride. Polyvinyl chloride soft board is thin, can be cut, and the price is low. The disadvantage is that the finish is not as good as the polystyrene board, and the bottom of the hole is not as flat as polystyrene. But the corresponding background value will also increase. Usually, ion grafting treatment is carried out on the surface of the ELISA plate, and active functional groups such as aldehyde groups, amino groups, and epoxy groups are introduced into the polymer surface to improve the performance of the substrate surface.

4. diversi meccanismi di legame

Il legame efficiente del materiale di rivestimento alla superficie inferiore della lastra è un passaggio cruciale nell'ELISA. Pertanto, le caratteristiche strutturali e le proprietà chimiche della sostanza da rivestire devono essere attentamente analizzate prima dell'esperimento per selezionare una lastra Elisa appropriata. In generale, ci sono diversi modi per legare il materiale di rivestimento al fondo della piastra: adsorbimento passivo, legame covalente e cattura per affinità.

Adsorbimento passivo: il meccanismo dell'adsorbimento passivo è complesso e il legame tra il materiale di rivestimento e il fondo della piastra si basa principalmente su forze intermolecolari (forza di van der Waals) e legami idrogeno. Nella maggior parte degli ELISA, il legame della sostanza di rivestimento al fondo della lastra avviene mediante adsorbimento passivo. Generalmente, il legame tra antigeni (o anticorpi) di peso molecolare medio e grande e il fondo della piastra viene realizzato mediante adsorbimento passivo. Le caratteristiche idrofobiche/idrofile della superficie inferiore della lastra sono spesso considerate quando si seleziona una lastra Elisa. La tabella seguente elenca l'ambito di applicazione e l'uso di diverse superfici di substrati idrofili:

Acquisizione dell'affinità: la cattura dell'affinità si basa sul legame specifico delle macromolecole marcate ai rispettivi recettori. Le macromolecole contrassegnate possono essere ottenute mediante accoppiamento chimico o mediante ingegneria genetica.

Le caratteristiche di Affinity Capture sono:

1.elevata specificità

2. Può migliorare il rapporto segnale-rumore dei risultati della misurazione

Le superfici del fondo del pozzo più comuni sono: superficie rivestita di streptavidina (streptavidina); superficie rivestita di chelato di nichel (Nickel Chelate) e superficie rivestita di glutatione (Glutatione, GSH).

3. Superficie della streptavidina: l'elevata affinità e specificità della streptavidina e della biotina vengono utilizzate per realizzare il legame della piastra inferiore alla proteina rivestita.

4. Superficie del chelato di nichel: il chelato di nichel è attaccato alla superficie del polimero per legare le proteine ​​di fusione con i tag His (istidina).

5. Superficie del glutatione: uso dell'enzima e della specificità del substrato tra glutatione e glutatione sulfidriltransferasi (GST) per ottenere il legame della piastra inferiore alla proteina del mantello.

Perché scegliere il piatto Elisa BKMAM?

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2. Adatto per colture cellulari aderenti,

3. Base piana, spessore uniforme e dimensione uniforme per poli di reazione,

4. Sterili con confezione singola,

5. Alta qualità con prezzo di fabbrica.